想要得出正確結(jié)論我們就必須嚴(yán)格按照要求來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，尤其是相關(guān)注意事項(xiàng)。接下來(lái)為大家說(shuō)一下ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)。

ELISA試劑盒操作技巧：

1.操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度（保持在18 C～25℃）、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等，要先檢查水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。

2.正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反響孔壁上，加樣器吸頭要清洗潔凈，避免污染，加樣次序要與說(shuō)明書共同，否則可導(dǎo)致成果錯(cuò)誤，試驗(yàn)重復(fù)性差。

3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗刷次數(shù)不要超越說(shuō)明書引薦的洗刷次數(shù)，洗液在反響孑L內(nèi)停留的時(shí)刻不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流，形成孔問(wèn)污染，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。

4.要確保加液量共同 咱們?cè)谶\(yùn)用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，形成顯色不統(tǒng)一，判別錯(cuò)誤。

5.顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反響，顯色液量不能過(guò)多，以免顯色過(guò)強(qiáng)。

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟：

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).